細胞自噬實驗技術
Experimental techniques for autophagy research
| 節 | 週一 |
|---|---|
7 15:30–16:20 | 細胞自噬實驗技術 YC501 2 節連堂 |
8 16:30–17:20 |
* 根據陽明交大上課時間表所列
這門課程旨在全面介紹自噬（Autophagy），這是細胞生物學中一個關鍵的過程，涉及細胞組件的降解和再利用。學生將會了解自噬作用的基礎知識以及學習如何在實驗室進行自噬相關的研究與分析。 課程的第一階段將會以對自噬的簡要介紹開始，使學生對該主題有廣泛的理解，並解釋研究自噬方法學的基本要點。我們將會建立用於研究自噬的實驗方法的基本知識。課程的第二階段主要為方法學的原理解說與實踐，其中包括：(1) 西方點墨法(Western blot)與免疫螢光分析(immunofluorescence)：學生將了解這兩種技術以及其在監測自噬中的應用；(2)自噬分析的量化和解讀：學生將學習如何量化和解釋自噬分析的結果；(3)自噬流量實驗(autophagy flux assay)：這一部分討論自噬流量指標，有助於更客觀的測量確定自噬的活性；(4)基於自噬受質(autophagy substrate)降解的分析：介紹各種基於特定自噬底物降解的分析方法；(5)與自噬相關的分子事件；(6)自噬的小分子藥物調節劑：介紹利用特定藥物抑制或是促進自噬的方法；(6)自噬的遺傳學模式(genetic models)：本部分深入介紹常見的自噬基因突變模式以及它們在自噬研究中的應用；(7)選擇性自噬的分析：學生將學習特定於選擇性自噬的分析方法，該過程涉及特定細胞組件的有針對性降解。在課程的最後階段，學生將參與小組討論，研讀與自噬相關的方法學論文。 整體來說，這門課程將為學生提供深入的自噬知識，使他們能夠掌握自噬的研究方法，以及理解自噬在細胞過程中的重要性。通過論文討論和實踐技術，學生將能夠在實驗室中有效的監測和分析自噬作用。
生物化學、普通生物學
平常成績 50% 期末討論 50%
| 週次 | 主題 |
|---|---|
| 第 1 週 | Overview on Autophagy (Lecture) |
| 第 2 週 | Fundamental points for establishing methods for autophagy (Lecture) |
| 第 3 週 | Common ways to monitor autophagy–Western blot (I) |
| 第 4 週 | Common ways to monitor autophagy–Western blot (II) |
| 第 5 週 | Immunofluorescent analyses of autophagy (I) |
| 第 6 週 | Immunofluorescent analyses of autophagy (II) |
| 第 7 週 | Quantification and interpretation of autophagy assay (Lecture) |
| 第 8 週 | Degradation OR NOT: autophagy flux reporters |
| 第 9 週 | Assays based on autophagy substrate degradation (Lecture) |
| 第 10 週 | Complementary assays: autophagy-related molecular events |
| 第 11 週 | Pharmacological modulators of autophagy (Lecture) |
| 第 12 週 | Genetic models for autophagy (Lecture) |
| 第 13 週 | Assays for selective autophagy (I) |
| 第 14 週 | Assays for selective autophagy (II) |
| 第 15 週 | Paper discussion |
| 第 16 週 | Paper discussion |
Guidelines for the use and interpretation of assays for monitoring autophagy (4th edition), Autophagy. 2021 Jan;17(1):1-382. doi: 10.1080/15548627.2020.1797280. https://www.tandfonline.com/doi/full/10.1080/15548627.2020.1797280